Aislamiento cultivo Estreptococos Flavobacterias Edwardsiella Weissella

Los 2 procedimientos son independientes, se dejarán 72 horas para su crecimiento en incubadora y es necesario realizar el servicio necropsia – diagnóstico histopatólogico previamente, si lo han confirmado con otro laboratorio nos lo pueden remitir.  El procedimiento consiste en una bateria de pruebas que se explica a continuación, podemos realizar aislamiento en caldo BHI previamente sin costo adicional:

• ESTREPTOCOCOSIS multiespecie
  1. Detección de bacterias cocos gram positivas.
  2. Colecta de pool (cerebro, bazo, hígado y riñón; además si existe lesión en piel con úlcera se puede realizar raspado).
  3. Aislamiento en agar sangre (5% sangre de cordero), colonias color blanco-grisáceo, brillantes, con un tamaño de 3-4 mm de diámetro, no hemólitica, analizando también sensibilidad a Vancomicina, las colonias grises presuntivamente será Streptococcus iniae.
  4. Prueba de CAMP con una incubación de 24 horas en atmosfera aeróbica y 35°C, si es «+» vemos una zona de hemólisis con una distancia de 4 mm, colonias grises presuntivamente presencia de Streptococcus agalactiae.

• FLAVOBACTERIOSIS multiespecie
  1. Detección de bacterias con forma de bastón gram negativas largos y delgados móviles.
  2. Colecta de hígado sobretodo en peces asintomaticos, en peces enfermos se puede aislar de branquias y mucus.
  3. Aislamiento en agar citofaga o MHA, incubación a 25°C durante 96 horas presencia de colonias amarillas pálidas indica positivo para Flavobacterium columnare.
  4. Aislamiento en agar citofaga o MHA, incubación a 15°C durante 96 horas presencia de colonias amarillas pálidas indica positivo para Flavobacterium psycrophillum, agente causante de la Enfermedad Bacteriana del agua fría BCWD.
  5. Aislamiento en agar citofaga o MHA, incubación a 10°C o 25°C durante 96 horas con agua de mar al 25% presencia de colonias amarillas pálidas indica positivo para Tenicibaculum maritimum.

• EDWARDSIELLOSIS «BNP» y «ESC» en bagres y otras especies
  1. Identificación de la bacteria gramnegativa Edwarsiella ictaluri con forma de bastón corto «pleomórfico» y móvil gracias a un flagelo.
  2. Se realiza hisopado estéril en la cavidad abdominal, hígado y cerebro.
  3. Contamos con 2 opciones para el aislamiento de esta bacteria: una es a partir del caldo BHI con agitación en un baño a 27°C durante 48 horas y la otra es mediante aislamiento en agar BHI en la incubadora a 30°C durante 72 horas. Las colonias son gris oscuro.

• FRANCISELLOSIS multiespecie
  1. Identificación de la bacteria gramnegativa Francisella orientalis, pleomórfica e inmóvil.
  2. Colonias pequeñas, verde grisáceo y no hemolíticas de 1-2 mm.
  3. Aislamiento en agar CHABH con más de 96 horas de cultivo a 28°C.

• WEISSELLOSIS en trucha
  1. Identificación de la bacteria Weissella ceti bacteria coco bacilo gram positiva e inmóvil.
  2. Se realiza hisopado estéril en la cavidad abdominal, hígado, riñón, ojo y músculo en caldo BHI.
  3. Aislamiento de las colonias en agar sangre a temperatura de 19°C durante 48 horas, en caso de que se requiera con extrema urgencia se podría a 30°C durante 18 horas. Se puede ajustar temperatura según condiciones del cultivo.
  4. Las colonias suelen tener 0,75 – 1 mm de diámetro y presentan alfa hemólisis.

• AEROMONIASIS multiespecie
  1. Identificación de la bacteria Aeromonas hydrophila bacilo Gram negativo, anaerobio facultativo y móvil.
  2. Se realiza hisopado estéril en úlceras, piel, aletas, branquias y cavidad abdominal con caldo BHI.
  3. Colonias lisas, convexas y redondeadas, que tienen entre un color tostado y beige.
  4. Es una bacteria termotolerante que puede estar entre un rango de 4 – 37°C, siendo la temperatura óptima de crecimiento a los 28°C.
  5. Las colonias suelen tener 0,75 – 1 mm de diámetro.